技术专利盘活专利发明专利2008.04.30#公开;2008.06.25#实质审查的生效;2010.01.06#授权

一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法

东北农业大学· 黑龙江· CN200710144570.8

专利概览

申请人: 东北农业大学
发明人: 姜毓君;相丽;闫冰;毕宇涵;曲妍妍;赵凤;刘伟
申请号: CN200710144570.8
专利号: CN200710144570.8
法律状态: 2008.04.30#公开;2008.06.25#实质审查的生效;2010.01.06#授权
主分类号: C12Q1/68
IPC: C12Q1/68

摘要

一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法，它属于基础生物学及医学领域。本发明解决了DNA残留，及菌体生长过程中管家基因表达不稳定和当PCR效率不高或多种基因间PCR效率差别较大时，所分析出的结果误差较大，致使现有基因表达相对定量在实际应用中具有一定局限性的问题。本发明的分析方法是将RNA提取物中的并存DNA作为内标，制备RT、RT－样品，通过相对定量公式计算出原核生物基因表达量，其中Q表示目的基因的表达量，Q′表示参照基因的表达量，ΔCt＝CtRT－CtRT－，ΔCt′＝ CtRT′－CtRT－′，E＝10[－1/slope]－1，Ct值是指荧光信号达到阈值时的循环数，RT表示反转录，RT－表示非反转录。本发明具有过程简单、易操作、一次性可进行大量样品检测、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点。