一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法

专利概览

申请人

中国农业科学院兰州兽医研究所

发明人

刘湘涛;尹双辉;孙世琪;田宏;尚佑军;韩雪清;刘艳红

申请号

CN200810150305.5

主分类号

C12N15/40

IPC

C12N15/40;C12N15/70;C07K14/08;G01N33/53

摘要

一种制备用于检测猪瘟病毒血清抗体的可溶性E2抗原的方法，包括下述步骤：A.克隆E2基因抗原结构域部分；B.构建重组表达载体；C.在LB培养基中表达，获得可溶性的重组E2蛋白；D.亲和层析纯化重组E2蛋白；E.pGST－E2表达蛋白的鉴定，SDS－PAGE和Western Blotting鉴定表达的重组E2蛋白；F.利用重组E2蛋白建立检测猪瘟血清抗体间接ELISA方法。本发明改良了传统的LB培养基，促进可溶性的E2蛋白表达；解决了猪瘟病毒E2抗原在大肠杆菌中主要以包涵体表达的难题，获得的可溶性E2蛋白与完整猪瘟病毒粒子具有相似的免疫学效果，可作为替代猪瘟病毒粒子的抗原，建立敏感性、特异、安全和可靠的猪瘟病毒血清抗体的检测间接ELISA方法。

转化信息

许可费

面议